Иммуногистохимическое исследование: что это такое, как проводится игх молочных желез

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы

Иммуногистохимическое исследование: что это такое, как проводится ИГХ молочных желез

При подозрении на наличие у пациентки злокачественной опухоли внутри молочной железы, врач обязан назначить комплексное исследование больного участка органа.

Некоторые из видов обследования являются стандартными, и входят в основу медицинского протокола при выявлении онкологии в грудной клетке. Не каждое новообразование, обнаруженное в груди можно сразу же диагностировать, как злокачественное.

Чтобы сделать такое заключение, онколог обязан отправить женщину на иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы.

Как происходит иммуногистохимическое исследование груди

После обнаружения в молочной железе нового образования, одним из обязательных анализов для проведения является иммуногистохимия. Суть ее выполнения заключается в том, что врачи проводят небольшую хирургическую операцию.

На больной груди делается микророзрез, в который вводят специальное оборудование, отбирающее часть ткани опухоли. Пациентка при этом находится под действием наркоза. После получения биологического материала новообразования, его обрабатывают специфическими антителами. Злокачественная опухоль вырабатывает свои агрессивные агенты, которые имеют белковую структуру.

Также они наделены способностью взаимодействовать с другими биологическими веществами, связывать их, и формировать с ними единую ткань. По итогам обработки опухолевого материала антигенами, ткань помещают под микроскоп для детального визуального исследования.

Раковая ткань с первых минут после обработки антителами начинает предпринимать действия по проникновению вовнутрь структуры антител. При визуальном осмотре материала через микроскоп видно, как обработанные антигеном клетки проявляют эффект флуоресценции. От них исходит тусклое свечение зеленоватого оттенка.

При этом можно просмотреть, как ткани опухоли связали вещество антигена, и образовали волнообразные соединения неправильной формы. Если наблюдается такая картина, то с 95% долей вероятности можно ставить диагноз — рак молочной железы.

Расшифровка результатов исследования входит в основу заключения о злокачественном характере новообразования. На сегодняшний день ИГХ является единственным способом получить достоверные данные об уровне агрессивности опухоли груди, и ее природе.

Что позволяет определить иммуногистохимическое исследование

Кроме установления наличия в опухоли доброкачественных или патогенных клеток, иммуногистохимия анализирует косвенные процессы жизнедеятельности новообразования, которые играют важную роль в формировании курса лечения. С помощью своевременно проведенной ИГХ врачи могут установить следующие информационные данные:

  • Идентифицируется тип и подтип новообразования. Речь идет именно о выяснении злокачественности опухоли РМЖ, и наличии у нее устойчивого восприятия к гормональной терапии, содержащей эстроген.
  • Устанавливается степень распространенности по организму раковых клеток. Насколько обширен очаг проникновения патогенных клеток опухоли из молочной железы в соседние ткани.
  • Выясняется, с какого именно участка новообразования происходит отделение метастаз с их дальнейшим выбросом в кровоток и лимфатические каналы.
  • Отслеживается уровень эффективности применения того или иного препарата. Для этого проводится регулярное исследование с помощью иммуногистохимического метода. Это дает возможность докторам увеличивать дозу лекарственного препарата в случае положительной динамики, либо же наоборот, исключать средство из курса терапии.
  • Определяется стадия рака молочной железы. Наиболее важный аспект в ходе исследования. Наличие этих данных ложится в основу подбора видов медикаментов, а также влияет на их дозировку.
  • Прогнозируются темпы роста опухоли внутри груди. По результатам ИГХ можно увидеть, насколько сильны зловредные клетки новообразования, как интенсивно они связывают введенные антитела, и насколько прочны их соединения. Исходя из этого, с помощью специальных формул можно рассчитать приблизительные темпы роста опухоли. Имея эти данные, врач уже знает клиническую картину развития болезни.

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы остается универсальным и наиболее точным методом диагностики. С помощью данного способа исследования врачи могут установить диагноз в кратчайшие сроки, и приступить к лечению пациентки, что повышает шансы на ее выживание.

Информативное видео

Источник: https://oncologypro.ru/rak-molochnoj-zhelezy/immunogistohimicheskoe-issledovanie-pri-rake-molochnoj-zhelezy.html

Ключевые особенности проведения игх молочной железы при опухолевых новообразованиях

Сейчас иммуногистохимическое исследование получило широкое распространение в практике диагностики, лечения и профилактики различных онкологических заболеваний. В основном этот метод применяется для проведения диагностирования в отношении анапластических опухолей и гематопоэтических новообразований.<\p>

Иммуногистохимическое исследование

Был выведен целый ряд определенных иммуногистохимических маркеров для исследования рака молочной железы.

Маркеры позволяют с высокой степенью точности определять характер дальнейшего развития заболевания путем анализа развития опухоли и ее роста.

С помощью этого можно составить определенный план по проведению необходимых лечебных мероприятий и предсказать их эффективность в конкретно взятом случае.

Наиболее распространено при игх молочной железы использовать определение таких рецепторов, как • Эстроген(ER) • Прогестерон(PR)

Без исследования этих рецепторов будет сложно назначить правильную и комплексную гормонотерапию.

Игх при раке молочной железы

Присутствие эстрогенов и прогестеронов выявляют в различных тканевых частях. Они также присутствуют в молочных железах, участвуя при этом в процессах синтеза РНК и белков.

Игх исследование молочной железы

Иммуногистохимическое исследование применяют не только при онкологии молочных желез, но также и при таких патологических заболеваниях, как: • Бесплодие • Нарушение репродуктивных функций

• Злокачественные заболевания матки

У женского пола такое заболевание, как рак молочной железы встречается очень часто. Шансы заболеть составляют 1 к 11 в возрасте от 13 и вплоть до 90 лет.

Поскольку все возникающие в этом случае опухоли в достаточной мере зависят от уровня вырабатываемых гормонов, то их переизбыток может привести к зарождению и последующему развитию ракового заболевания.

Эстрогены и прогестероны в таком случае будут провоцировать рост опухоли и появление метастаз.

Всем больным при раке молочной железы нужно в обязательном порядке пройти иммуногистохимическое исследование на предмет выявления экспрессии гормонов ЭР и ПР для того, чтобы уточнить этап развития заболевания и назначить гормональное лечение на основе вышеприведенных исследований.

Опухоли, которые содержат высокую концентрацию эстрогенов и прогестеронов в большинстве своем ведут себя неагрессивно, имеют малую активность. При лечении таких опухолей гормональная терапия будет оказывать значительный эффект.

Вероятность эффективности проведения гормонального лечения при опухолях, которые экспрессируют рецепторы к эстрогенам (ЭР+), составляет около 50%.

Вероятность же эффективности проведения гормонального лечения при опухолях, которые экспрессируют рецепторы и к эстрогенам, и к прогестерону (ЭР+/ПР+), составляет более 75% (благоприятный прогноз).

ИГХ исследование

При экспрессии опухолями малого количества рецепторов к эстрогенам (ЭР-), проведение гормональной терапии обычно малоэффективно и не приносит должного эффекта. Исключением из правила является экспрессия клеток опухоли к прогестерону (ЭР-/ПР+) при отсутствии экспрессии к эстрогенам (ЭР-). При таком раскладе эффективность проведения гормональной терапии возрастает до 10%.

Поэтому исследование экспрессии рецепторов ЭР и ПР крайне необходимо при раке молочной железы, ведь это позволяет выявить, насколько эффективным будет гормональное лечение в каждых конкретных случаях.

Некоторая сопротивляемость к гормональной терапии наблюдается даже у пациентов, имеющих результаты экспрессии ЭР+ и ПР+, ИГХ молочной железы все же необходимо проводить в обязательном порядке для определения точных параметров заболевания.

Игх исследование расшифровка молочной железы

Интерпретировать результаты иммуногистохимического исследования может только лечащий врач. Результаты игх молочной железы при этом не являются диагнозом для пациента.

Информацию из результатов исследования нельзя прямо использовать для назначения гормонального лечения, все данные носят лишь информационный характер и могут быть применимы только для назначения рекомендаций.

Постановку точного диагноза производит лечащий врач на основе результатов расшифровки иммуногистохимического исследования и анализа других источников, таких как анамнез, результаты других исследований и.т.д.

Расшифровка исследования

При расшифровке результатов ИГХ пользуются процентными единицами измерения.
Описание: производится процентная интерпретация соотношения количества клеток с экспрессией к экстрогенам и прогестерону к общему количеству клеток опухоли.

Приводится индивидуальный диапазон цифровых и процентных значений, которые могут находится в зависимости от многих факторов.

Выдача результата: результат выводят путем морфологической оценки состояния эндометрия или опухоли.

Результат выводят путем расчета соотношения количества ядер клеток с окраской к неокрашенным в совокупности на 100 клеток при увеличении в 40 раз в 10 репрезентативных полях.

Источник: http://moloczheleza.ru/issledovaniya/igh-molochnoj-zhelezy.html

Проведение иммуногистохимического исследования груди. ИГХ

К сожалению, сегодня все больше женщин сталкиваются с проблемами наличия отклонений в развитии и функционировании молочной железы. Для того чтобы подтвердить или опровергнуть самые худшие ожидания, необходимо провести процедуру иммуногистохимического исследования (ИГХ). Данная методика считается самой доступной и точной для установления наличия раковых опухолей в женской груди.

Что представляет собой данное исследование

Иммуногистохимическое исследование — методика тщательного изучения ткани молочной железы, при которой применяется специальный реактив. Когда необходимый материал, который обычно можно получить при биопсии или после операции, попадает в лабораторию, то его окрашивают при помощи медицинских красителей.

Данные красители представляют собой особые антитела, которые, в свою очередь, обозначены специальными веществами. Антитело состоит из белка. Во время проведения процедуры игх белок может соединяться с тканями (если таковые имеются), в результате чего будет происходить реакция. Именно по ее развитию можно предполагать о наличии того или иного заболевания у пациента.

Что можно диагностировать, проведя иммуногистохимическое исследование

Данная процедура назначается врачом маммологом либо сопутствующим специалистом. Она необходима для того, чтобы установить следующие показатели:

  1. Определить гистогенетическое происхождение новообразования.
  2. Диагностировать нозологический вариант опухоли.
  3. Диагностировать новообразование первичного характера только лишь по наличию метастаз.
  4. Установить длительность развития онкологического недуга.
  5. Установить, каким образом клетки приобретают злокачественный характер.
  6. Понять, насколько эффективным может оказаться таргентная терапия.
  7. Установить, как реагирует опухоль на проводимое химиотерапевтическое лечение (чувствительность и резистентность).
  8. Понять, какое влияние на опухоль оказывает применение лучевой терапии.

Полученный анализ исследования позволяет установить четкую картину болезни. На основании игх процедуры специалист может приступить к своевременному лечению новообразования и избежать тяжелых осложнений данной болезни.

Процедура проведения ИГХ

Иммуногистохимическое исследование молочной железы заключается в том, чтобы в первую очередь добыть необходимый элемент ткани, который располагается поблизи опухоли. Для этого проводится трепан-биопсия. После получения ткани, материал необходимо зафиксировать. Только потом его отправляют на дальнейшее исследование.

Полученные образцы ткани заливаются специальным парафином, благодаря чему образуются гистологические блоки. Эти блоки могут сохраняться длительное время и могут быть использованы при первом необходимом случае.

Затем специалист должен провести микротомирование. Для этого в парафиновых блоках производятся небольшие разрезы до 1мкм и позже кладутся в подготовленные гистологические контейнеры (стекла).

Только после проведения всех этих манипуляций можно приступать к совершению процедуры окрашивания. Специальные красители, которые используются на различных этапах, позволяют установить фенотип и нозологию образования в молочной железе.

Как расшифровать анализ

Специалисты утверждают, что проведение ИГХ дает возможность выявить негативный и позитивный рак молочной железы. При этом негативный рак будет содержать гены и рецепторы HER2.

Читайте также:  Когда перестает болеть грудь при беременности: на каком сроке - на какой неделе

Такие результаты наблюдаются в 75% всех случаев. Позитивный рак HER2 отличается тем, что при нем происходит активная выработка специального рецептора.

Обычно при наличии новообразования подобные показатели могут диагностироваться в 25% случаев.

HER2 позитивного характера развивается агрессивно и намного быстрее, чем отрицательный рак. Хотя, для его лечения существуют специальные лекарственные средства, которые в случае негативного HER2 не оказывают никакого позитивного эффекта.

Почему при диагностировании рака молочной железы нужно установить характер HER2

Для того чтобы провести правильное лечение, необходимо в обязательном порядке провести процедуру ИГХ. Только на ее основаниях можно установить положительный или отрицательный характер HER2.

Если анализ подтверждает положительный HER2, то врач может назначить для проведения терапии такие препараты, как «Лапатаниб» и «Герцептин». Следует знать о том, что данные медикаменты могут использоваться только для того, чтобы лечить положительный HER2. Их категорически запрещается использовать для лечения негативной формы HER2 молочной железы.

Характерную особенность HER2 сегодня можно установить несколькими способами. К ним относятся:

  • Иммуногистохимия.
  • SPoT-Light HER2 CISH.
  • Inform HER2 Dual ISH.
  • FISH.

Расшифровка полученных результатов иммуногистохимического исследования

Использование красителей позволят установить количество протеинов в ткани. Чем больше будет находиться рецепторов М в исследуемой ткани, тем насыщенней будет получаться цвет. Анализ можно оценивать по специальной шкале от 0 до +3.

Данные проведенного ИГХ можно расшифровать таким способом:

  • Если никакой реакции не происходит, то дается оценка 0. Это свидетельствует о наличии отрицательного HER2 характера. В такой ситуации использование медикаментозных препаратов не нужно.
  • При оценке +1 или + необходимо провести повторное обследование, чтобы подтвердить наличие HER2 статуса больного.
  • Оценка 2+ или ++ считается двусмысленным. В таких случаях четко установить отрицательный или положительный характер HER2 не удается. Для получения более четких данных специалисты советуют провести FISH исследования.
  • Оценка 3+ или +++ свидетельствует о наличии положительного HER2 характера. В качестве лечения нужно использовать препараты «Тайвердом» и «Герцептин».

Насколько точными будут результаты проведенного исследования, зависит от ответственности, с которой выполняет свою работу лаборант. Также необходимо учитывать тот факт, что в различных медицинских учреждениях критерии расшифровки шкалы могут носить абсолютно противоположные данные.

Источник: http://therapycancer.ru/novosti/rak/4393-provedenie-immunogistokhimicheskogo-issledovaniya-grudi-igkh

Гистология и иммуногистохимия

Очень много вопросов мне задают больные и их родственники относительно такой, казалось бы, простой, вещи – как гистологическое исследование (гистология) и иммуногистохимическое исследование (иммуногистохимия, ИГХ).

Ответить на некоторые их этих вопросов – и есть цель этой статьи. Прошу моих более искушенных читателей извинить меня за некоторые упрощения, допущенные при написании данного материала, мое желание при этом было одно – обеспечить максимальную доступность текста широкому кругу непосвященных людей.

Гистологическое исследование —  исследование любой ткани, которая была взята в процессе (как правило) биопсии у человека. Гистологическое исследование, наряду с иммуногистохимическим исследованием —  самое важное исследование в диагностике новообразования пациента и крайне необходимо для назначения дальнейшего лечения.

Без гистологического анализа (или без иммуногистохимического анализа) патологической ткани однозначно поставить пациенту  диагноз – злокачественное новообразование – невозможно, несмотря на имеющиеся у врача-онколога данные различных иных анализов и исследований.

Гистологическое исследование выполняет специальный врач – специалист по патоморфологии, ткань исследуется с помощью микроскопа.  Исследованию подвергается биопсийный, либо, непосредственно,  операционный материал.

Само исследование может быть срочным – обычно такое происходит, когда пациента оперируют, даже и по другому поводу, и занимает минут 30 (с последующим обязательным пересмотром) и плановое  — до 10 дней.

Точность гистологического исследования сильно зависит от того, насколько качественно взят материал, как качественно работает сама лаборатория, насколько высока квалификация врача, проводящего это исследование.

Именно поэтому бывает так, что при пересмотре гистологии результаты отличаются. Поэтому пересматривать препараты можно, а иногда и просто необходимо.

Что же такое  — биопсия

Биопсия (от латинского «био» — жизнь и «опсия» — смотрю) — это  взятие (из живого организма) тканей для дальнейшего  их микроскопического исследования после окраски специальными красителями. Биопсия  при большинстве онкологических заболеваний — обязательный метод исследования для  постановки  диагноза.

Биопсийный материал берется разными способами – с помощью специальной иглы, отщипыванием кусочка ткани, исследуются промывочные воды и т.п.

Само взятие биопсийного материала, как правило, безболезненно. Неприятен, зачастую, процесс взятия – это сопряжено с трудностями доступа к некоторым новообразованиям.

В ряде случаев, в процессе биопсии применим наркоз, во многих случаях биопсия делается

под инструментальным (например — УЗИ) контролем. 

Бывает, что сразу требуется и удаление имеющегося новообразования и биопсия сразу – и исследование и лечение  (скажем, при удалении полипа с целью исследования таким

образом происходит и излечение).

Иммуногистохимия (ИГХ) – метод идентификации специфичных антигенных свойств злокачественных новообразований. 

Иммуногистохимическое исследование –  отличная и достаточно современная методика  дифференциальной диагностики злокачественных новообразований. ИГХ позволит исследователю  определить гистогенез опухоли на клеточном уровне.

Иммуногистохимия позволит  оценить темп роста клеток опухоли, прогноз, реакция на химиотерапию, возможность  гормонального лечения, ответ опухоли на так нызываемые таргетные препараты.

С помощью ИГХ определяют:

•        наличие рецепторов стероидных гормонов (прогестерона и эстрогена при РМЖ);

•        экспрессию  HER-2/neu в клетках при  РМЖ;

•        производится иммунодиагностика лимфопролиферативных процессов (определяются ходжкинские и неходжкинские лимфомы);

•        гистогенетическую принадлежность метастатических опухолей (когда первичный очаг новообразования не определен);

•        гистогенетическую принадлежность неклассифицируемых опухолей.

Для ИГХ  возможно  использовать с всежие срезы,и  приготовленные из парафиновых блоков  много лет назад.

При ИГХ исследовании недифференцированных опухолей удается установить их тканевую или даже органную принадлежность, это позволит подтвердить или опровергнуть  метастатический характер исследуемой опухоли новообразования и  выявить первичную опухоль.

Несмотря на то, что ИГХ более информативна, чем гистология, в ряде случаев необходимо именно гистологическое исследование. Так, например, иммуногистохимия не поможет отличить меланому от невуса, так как они будут окрашиваться одинаково, зато с этой задачей прекрасно справится гистологический анализ.

Диагноз: c-r правосторонный . T2N0M0

Иследовано 15 фрагментов ткани молочной железы:

  • 10 из них дукталная карцинома insitu, солидного и криброформного типа, G2 , максимальной протяжёностью 9 мм: выявляются фокусы инвазивного неспецифицированного рака: строма с выраженным склерозом, местами с диффузной лимфоидной инфилтрацией по переферии инвазивного компонента, формированием лимфоидных фолликулов.  
  • 5 фрагментов – ткань молочной железы с аденозом. По данному материалу стадирование онкопроцесса не представляется возможным.

А вот результат иммуногистохимии этого же новообразования в груди.

Иследовано 15 фрагментов ткани молочной железы: инвазивный неспецифицированный рак правой молочной железы G 2 (3+2+1=6б) по Elton&Ellis.  Протяженность 9 мм, опухолевые клетки в краях резекции, при окрашивании SMM отсутствие миоэпителия.  Внутрипротоковый компонент солидного и криброформного типа, G2. Строма с выраженным склерозом, местами с диффузной лимфоидных фолликулов.

5 фрагментов – ткань молочной железы с аденозом. По данному материалу стадирование онкопроцесса не представляется возможным.

ИГХ исследование на  HER2 – слабое неполное мембранное окрашивание более 10%.  Инвазивных опухолевых клеток -2б сверхэкспрессия  HER2 / neu не определена. ИГХ исследование на ЕR-30%. Инвазивного компонента 3б+2б=5б. ИГХ исследование на PR-15%- Инвазивного компонента 3б+2б=5б . ИГХ исследование на Ki-67-20%.

Обобщенно, ИГХ дает нам следующее –

Герцепт — статус  — отрицательный, т.е. лечение Герцептином не показано.

Выявлена чувствительность опухоли к эстрогену и прогестерону, что дает возможность назначить тамоксифен или ингибиторы ароматазы.

Инвазивный компонент указывается в баллах. В данном случае 5б — на границе с низкой и средней степенью злокачественности.

Показатель G указывает на степень дифференцированности опухолевых клеток. В данном случае G2 — средняя степень.

Ki-67- говоря по простому, показывает, насколько агрессивен рост опухоли. До 15% — низкоагрессивная, 30% и более — высокоагрессивная.

Иными словами, данное новообразование возможно лечить гормональными препаратами и химиотерапией, но оно не поддается лечению Трастузумабом.

При таком раскладе, прогноз, в общем, благоприятный.

Таким образом – гистологическое исследование и иммуногистохимическое исследование являются высокоинформативными и крайне необходимыми при подозрении на наличие злокачественного новообразования,  отказываться от проведения данного исследования нельзя.

Источник: http://www.onkolog-rf.ru/gistologiia-immunogistokhimiia

Для чего и когда проводится ИГХ-исследование? Стоимость диагностики

Иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы – один из базовых анализов, применяемых в онкологии.

В чем суть этого исследования, когда и как оно применяется, какие противопоказания имеет, каков прогноз заболевания, — эти вопросы являются наиболее актуальными для пациентов, страдающих от подобных заболеваний.

Когда требуется ИГХ, показания

Для того чтобы ответить на вопрос о показаниях, и выяснить, для чего нужно ИГХ исследование, сначала необходимо уяснить, что же это такое.

Все наверняка помнят со школьных лет опыт, когда капля настойки йода с абсолютной точностью выявляла в образце крахмал.

Йод вступал с крахмалом в реакцию, результатом которой было образование пятна характерного темно-фиолетового цвета.

Тот же принцип положен и в основу ИГХ, с той только разницей, что реакция вещество-антитело не имеет видимых цветовых эффектов.

Для справки!

Иммуногистохимическое исследование – это воздействие на образцы тканей с целью выявления определенных веществ.

Воздействие производится реактивами, содержащими антитела к искомому веществу. Антитело вступает в реакцию с объектом исследования, обозначая его присутствие.

Но ученные нашли выход: антитела подкрашиваются искусственно. Вступившие в реакцию вещества образуют с искомым элементов связи, наглядно обозначая присутствие последнего.

Гистохимический метод исследования позволяет с высокой точностью выявлять вещества, сопровождающие образование злокачественных изменений в организме – раковых клеток и метастазов.

Благодаря этому тесту можно определиться с дальнейшим прогнозом. Таким образом, основное показание к ИГХ исследованию – подозрение у пациента онкологических заболеваний, конкретно, РМЖ.

Возможности гистологического исследования ИГХ:

  • определение типа (злокачественное/доброкачественное) образований;
  • прогноз возможного развития опухолевого заболевания;
  • выявление метастазирования карциномы;
  • определение эффективности различных способов лечения;

Кроме того, ИГХ метод имеет широкое распространение в других областях медицины, в частности, в гинекологии, где большое распространение получило иммуногистохимическое исследование эндометрия.

Важно!

ИГХ позволяет выявлять рак на самых ранних (клеточных) стадиях, что, безусловно, имеет решающее значение для успешного лечения болезни и прогноза.

Что показывает ИГХ?

Выявляемые в ходе иммуногистохимического исследования вещества являются маркерами различных происходящих в организме пациента процессов.

Расшифровка и интерпретация ключевых параметров, исследуемых с помощью гистохимии, поможет более подробно разобраться в вопросе.

HER2

Анализ на HER2 – стандартная процедура при подозрении онкологии молочной железы.

Он позволяет выявить вещества, свидетельствующие о наличии популяции пролиферирующих (бесконтрольно делящихся), что и характеризует опухолевые заболевания.

Объектом ИГХ исследования на HER2 является микроскопический образец ткани молочной железы. Интерпретация результатов анализа представлена в таблице:

ИндексНаименованиеИнтерпретация
HER2-отрицательный Опухоль малоагрессивна
1+ или (+) HER2-отрицательный Рекомендуется проведение анализа FISH
2+ или (++) Спорное значение – невозможно дать однозначный результат с помощью методики ИГХ. Обязательно обследование FISH!
3+ или (+++) HER2-положительный Выраженная агрессивность опухоли – раковое заболевание
Читайте также:  Полисорб при грудном вскармливании: можно ли принимать кормящей маме при лактации и гв

Расшифровка аббревиатуры HER2 – human epidermal growth factor receptor 2 – рецептор фактора эпидеомального роста у человека. В норме он отвечает за деление и рост клеток.

Нюанс!

Наличие повышенного числа рецепторов роста как раз и свидетельствует о неконтролируемом, избыточном росте и делении клеток ткани.

FISH

Анализ ФИШ при раке молочной железы или FISH-исследование – дорогостоящий, но более точный метод, способный однозначно выявить амплификацию (аномальное увеличение) фактора HER2.

При анализе FISH также используются подкрашенные маркеры, однако в данном случае они вступают в реакцию с отдельными участками хромосомы, что позволяет получать гораздо более точный результат.

При исследовании возможны только два показателя индекса:

Обследование FISH не оставляет недомолвок, результат индекса трактуется однозначно.

KI-67

KI-67 при раке молочной железы (КИ 67) является маркером пролиферации (пролиферативная активность – показатель интенсивности деления клеток).

Анализ на KI-67 маркер проводится при выявлении злокачественной опухоли и ставит своей целью определение эффективности химиотерапевтических методов лечения.

Результат анализа обозначается в процентах (KI-67 n%) и интерпретируется следующим образом:

  • КИ 67 < 30%
  • КИ 67 30-50%
  • КИ 67 > 50%

Химиотерапия неэффективна, показана гормональная терапия

Применима химиотерапия в сочетании с другими методами лечения

В дополнение к анализу на индекс КИ 67 нередко назначают иммуногистохимию при раке молочной железы на белок P53.

Важно!

Химиотерапия – очень агрессивный метод, врачи обычно стараются заменять его более щадящими способами лечения.

Анализ на маркер пролиферативной активности по KI-67 позволяет применять химиотерапию только при максимальной ее эффективности.

Белок P53

В организме белок P53 играет роль регулятора клеточного цикла. Данный элемент является маркером злокачественности опухоли – то есть, способности опухолевых клеток образовывать метастазы.

Для справки!

Чем ВЫШЕ белок P53 – тем НИЖЕ способность клеток опухоли к метастазированию, и наоборот.

ER/PR

Еще одно распространенное иммуногистохимическое исследование при раке грудной железы. ER и PR – это рецепторы к эстрогенам и прогестерону соответственно.

Наличие этих рецепторов в образце служи маркером того, что опухоль развивается под воздействием гормонов. Следовательно, необходимо лечение методами гормональной терапии.

Результат анализа ER/PR обозначается в баллах от 0 до 10. Чем выше показатель, тем выше чувствительность к гормональной терапии:

Опухоль нечувствительна к гормональной терапии

Рекомендуется гормональное лечение

Интенсивность гормонального лечения определяется показателем ER/PR.

Подготовка

Материалом для исследования ИГХ служит образец ткани, полученный при операции.

При любом удалении опухолевого образования, обязательно образец ткани отправляется на гистологию.

Либо же производится биопсия – прижизненный забор образца ткани у пациента.

Пугаться этого не стоит, забор производится в микроскопических количествах, и процедура совершенно безболезненна.

В любом случае, какая-либо специальная подготовка не требуется.

Как проводится ИГХ?

Полученный путем биопсии или в ходе операции образец (биоптат) консервируется в формалине и отправляется в лабораторию.

Разумеется, в таком «натуральном» виде участок ткани для исследования непригоден. Специалисты выполняют ряд манипуляций:

  1. Образец обезжиривается и заливается парафином. В таком виде клеточный материал может храниться неограниченный срок – всегда есть возможность повторить исследование.
  2. Образец препарируется – с помощью микротомического аппарата получают срез образца толщиной в несколько микрон, который помещается на предметное стекло микроскопа. Количество срезов зависит от «ассортимента» анализов. Так называемая, «малая панель», включает анализы на пять маркеров.
  3. На препараты наносятся реагенты, содержащие антитела.

Результат изучается под микроскопом.

Игх эндометрия

ИГХ применяется не только в онкологии. Распространенным анализом, применяемым в гинекологии, является иммуногистохимия эндометрия.

Для справки!

Эндометрий – поверхность слизистой оболочки внутренней полости матки.

Показанием к Игх эндометрия являются такие проблемы:

  • невынашивание беременности;
  • аутоиммунные реакции (отторжение плода);
  • неудачные попытки зачатия;
  • ряд неудачных процедур ЭКО;
  • хронический эндометрит.

Данный вид исследования имеет свои особенности. Так, например, день цикла, в который производится забор биоптата, зависит от целей исследования.

В ходе иммуногистхимического исследования эндометрия выявляется чувствительность к различным гормонам, что позволяет выбрать верный метод лечения либо выяснить, что проблемы носят механический характер (например, спайки труб) и определить прогноз.

Есть ли противопоказания к ИГХ? Иммуногистохимическое исследование проводится с изъятым образцом ткани вне организма.

Где можно сделать?

Иммуногистохимия является частью комплекса обследований, назначаемых лечащим врачом в зависимости от той проблемы, которая беспокоит пациента.

Но при желании можно и самостоятельно обратиться непосредственно в лабораторию, оснащенную соответствующим оборудованием.

В Москве к таковым относятся следующие медицинские учреждения:

ЛДЦ «Кутузовский»

ОАО «Медицина»

Клинка «Эдем»

Клиника «Атлас»

30500 руб;
20133 руб;
15000 руб;
10000 руб.

В указанную стоимость входит комплексное исследование. Однако можно заказать исследование на одно антитело.

В ЛДЦ «Кутузовский» такая услуга обойдется в 5900 руб. Пересмотр готового препарата специалистами клиники будет стоить 2800 руб.

В Санкт-Петербурге цены несколько ниже, но и количество предложений значительно меньше. Комплексное ИГХ исследование в клинике МЧС обойдется желающим в 10 000 руб.

Конечно, иммуногистохимия – не самая дешевая процедура, но нельзя забывать, во всем, что касается медицины, а, тем более онкологических патологий, ставки очень высоки.

Не стоит экономить на собственном здоровье и отказываться от такого необходимого гистологического исследования.

Источник: https://GrudOk.ru/obsledovaniya/igx-issledovanie-chto-eto-takoe

Игх исследование — помощник в расшифровке биологии рака молочной железы

Несмотря на то, что всё больше в клиниках начинают использоваться методы генетического фенотипирования опухолей, ИГХ исследование остается на сегодня основным помощником в расшифровки биологии рака молочной железы, в прогнозировании его дальнейшего развития, “предсказателем” ответа опухоли на запланированное лечение.

В этой статье вы узнаете: что такое иммуногистохимическое (ИГХ) исследование, какое значение ИГХ имеет при раке молочной железы.

Гистохимия (окрашивание срезов в гистологии)

Перед тем, как патологоанатом (морфолог) начнёт рассматривать под микроскопом участок ткани молочной железы, полученный в результате биопсии, ему необходимо его окрасить специальными красителями.

Гистохимические красители наносят на тонкий срез участка ткани, чтобы рассмотреть под микроскопом, какие клетки там присутствуют, их расположение по отношению друг к другу (структуру ткани). Световая микроскопия является рутинным методом изучения окрашенных срезов ткани, широко используется в диагностике рака молочной железы. Наиболее часто для окрашивания срезов ткани используют:

  • Гематоксилин — окрашивает клеточное ядро в темно-синий цвет;
  • Эозином — делает цитоплазму клеток розовой. Совместное их использование называется гематоксилин-эозиновое окрашивание.

Патологоанатом — это врач, который долго учился в медицинском университете, чтобы знать, как с помощью микроскопа отличить в окрашенном срезе ткани раковые клетки от нормальных.

Обычно для постановки диагноза (доброкачественная это патология или злокачественная) ему достаточно рассмотреть под микроскопом срез ткани, окрашенный гематоксилином и эозином. Но иногда этого бывает недостаточно.

В такой ситуации на помощь приходит иммуногистохимия, которая к морфологической идентификации клеток и тканей добавляет иммунологический компонент.

Методика иммуногистохимии (ИГХ) дополняет морфологическое распознавание клеток и тканей, используя антитела к известным антигенам, которые являются специфическими для определенных типов клеток или клеточных компонентов. Расположение этих антител можно увидеть, используя световую микроскопию, так как антитела содержат зрительно-распознающиеся метки.

Первые методики иммуногистохимического анализа рака молочной железы использовали антитела с прикрепленными к ним флуоресцирующими метками, что требовало применения специального флуоресцентного микроскопа, позволяющего увидеть локализацию этих антител в срезе ткани молочной железы.

За последние 30 лет удалось существенно упростить методику, которая применяется при ИГХ исследовании молочной железы, за счет использования более специфичных антител (моноклональных антител) с ферментативными метками.

Это, в свою очередь, позволило при иммуногистологических исследованиях молочной железы использовать световую микроскопию, которая намного дешевле, и поэтому наиболее доступная.

Однако радиоактивные элементы (пероксидаза, щелочная фосфатаза и флуоресцеин), без которых иногда не обойтись, требуют специальных методик и до сих пор широко используются.

Возникшая ситуация у каждой конкретной женщины с раком молочной железы требует применения тех или иных наборов антигенов (панелей антигенов), что в свою очередь требует от специалиста, выполняющего ИГХ, исследование срезов ткани молочной железы, знаний и громадного опыта.

Необходимость использования иммуногистохимии при раке молочной железы, контроль её качества и интерпретация полученных результатов должны контролироваться патоморфологическим отделением.

Важно, чтобы расшифровка полученных данных при ИГХ исследовании использовалась только в сочетании с морфологическим анализом тканей молочной железы, полученным в результате покраски их гематоксилином и эозином.

Сегодня иммуногистохимическое исследование при раке молочной железы является рутинным методом в большинстве морфологических (патогистологических) лабораториях и используется для уточнения диагноза, а также с прогностической целью, в качестве предикативного (предсказывающего) указателя, как поведет себя рак молочной железы в дальнейшем.

Диагностика рака груди и ИГХ

Когда патологоанатом рассматривает под микроскопом биопсийный материал, перед ним стоит две основные диагностические задачи: определить происхождение опухолевых клеток, где они появились (в протоках, в дольках или в других участках молочной железы) и подтвердить или исключить их вторжение в близлежащие ткани.

Диагностические ИГХ маркеры, применяемые при раке груди

С первых дней использования ИГХ в онкологии велся поиск новых и совершенствовались уже существующие технологии применения антител, которые могли бы идентифицировать антигены клеток с высокой степенью специфичности и чувствительности. Перечисленные ниже ИГХ маркеры в настоящее время широко используются для уточнения гистопатологического диагноза рака молочной железы:

Цитокератины

  • CK5, CK10, CK14 и CK17 являются цитокератинами базального слоя эпителия, экспрессируются миоэпителиальными клетками.
  • CK5/6 или “базальные цитокератины» помогают распознать нормальные клетки молочной железы как миоэпителиальные, так и ламинарные (секретирующие).
  • 34β12: это антитело помогает распознать цитокератины 1, 5, 10 и 14.

Маркеры гладких мышц

  • Н-caldesmon. Его можно найти только в миоэпителиальных клетках молочных протоков, поэтому он обладает высокой специфичностью.
  • Гладкомышечный актин (SMA). Это антитело помогает обнаружить актин в микрофиламентах; низкая специфичность, так как SMA обнаруживается в фибробластах (в тканях, которые регенерируют).
  • Миозин тяжелых цепей гладких мышц (SMMHC) — структурный компонент миозина гладких мышц в SM2 изоформе. Экспрессируется миоэпителиальными клетками молочной железы, обладает высокой чувствительностью и специфичностью, так как SMMHC присутствует только в миоэпителиальных клетках, расположенных в протоках и дольках молочной железы, но отсутствует в фибробластах соединительной ткани железы.
  • Calponin — полипептид, 34 кДа, модулирует активность актомиозина. Хорошая чувствительность, но присутствует в фибробластах соединительной ткани молочной железы.
  • P63-p53 гомолог — ядерный маркер, весьма чувствительный к миоэпителиальным клеткам.
  • CALLA: эндопептид, который экспрессируется в миоэпителиальных клетках.
  • P-cadherin — молекула клеточной адгезии с высокой чувствительностью к миоэпителиальным клеткам нормальной ткани молочной железы. Не вступает в реакцию с фибробластами.
Читайте также:  Препараты для лечения мастопатии: список гормональных таблеток и других лекарств

Другие маркеры

  • Е-кадгерин — молекула клеточной адгезии. Используется, чтобы отличить протоковую карциному “in suti” (DCIS) от дольковой. Карциномы “in suti” (LCIS) — DCIS, как правило, выявляются по окрашиванию мембраны, в отличие от LCIS, при которой её нет.
  • Маркеры меланомы: S100, Melan-A, HMB45.
  • Маркеры лимфоцитов: CD20, LCA, CD15, CD30.
  • Маркеры эндотелия сосудов: CD31, CD34, фактор VIII, d2-40 (podoplanin).
  • Маркеры клеточной пролиферации: Ki67, MIB-1, PPh3.
  • Маркеры апоптоза: Bcl-2 и Вах, Bcl-X.

Примеры использования ИГХ для разрешения проблем, возникших при определении патологии молочной железы

Существует много ситуаций, когда иммуногистохимия способствует постановке заключительного патогистологического диагноза при патологии молочных желез:

  • Окрашивание e-кадгерином клеточной мембраны позволяет исключить дольковые неоплазии (ALH) и LCIS. Отсутствие окрашивания клеточной мембраны говорит в пользу дольковых опухолей.
  • Обычная гиперплазия эпителия, или это эпителиальная атипия, или это DCIS. При доброкачественной гиперплазии можно обнаружить реактивность к CK5/6 и CK14, тогда как при атипической гиперплазии и DCIS её нет.

Это микро-инвазивная карцинома или что-то другое? Применение маркеров миоэпителиальных клеток имеет значение при оценке, присутствует или нет микро-инвазия карциномы (вторжение из ламинарного слоя в миоэпителиальный слой клеток).

Реактивность фибробластов, разрыв в окрашивании клеток, окрашивание миоэпителиальных клеток гладких мышц сосудов могут вызвать затруднения в интерпретации наблюдаемой картины под микроскопом.

В этой ситуации используются два маркера миоэпителиальных клеток, например, p63 и SMMHC, или ASMA, или calponin.

Какие ИГХ маркеры используются в диагностических панелях при патологии молочных желез

Набор маркеров (диагностическая панель), который используется в ИГХ исследованиях при раке молочной железы, во многом зависит от оснащенности лаборатории, в которой проводится иммуногистохимия, и опыта врача, проводящей ее. Ниже приведены рекомендации, какие ИГХ панели необходимо применять при патологии молочных желез, предоставленные одной из клиник:

  • Миозин тяжелых цепей гладких мышц (SMMHC) или calponin — маркеры чувствительны и специфичны к цитоплазме миоэпителиальных клеток;
  • Актин гладких мышц может быть использован, но все равно в интерпретации следует учитывать, что он присутствует в фибробластах (воспаление и рубец);
  • P63 является чувствительным и специфичным маркером к ядрам миоэпителиальных клеток, но окрашивание может быть прерывистым. Применение маркера к цитоплазме миоэпителиальных клеток, таких как SMMHC или calponin, следует использовать, чтобы не возникли проблемы в интерпретации полученной картины.

При попытке определить наличие или отсутствие миоэпителиальных клеток следует использовать p63 и SMMHC, или calponin.

Роль иммуногистохимии в определении “прогностических” и “предиктивных” факторов при раке молочной железы

Прогностические факторы предоставляют информацию о возможном поведении рака молочной железы на момент его диагностики и не зависят от терапии. То есть с помощью них можно судить, как будет быстро прогрессировать рак и, соответственно, в зависимости от этого принять решение, какой объем и лечение предпочтительны в каждой конкретной ситуации.

В свою очередь, “предиктивные” (предсказывающие) факторы обеспечивают информацией, которая позволяет судить о вероятности ответа опухоли на конкретную терапию. Несмотря на то, что прогностические и предиктивные факторы возможно систематизировать по отдельности, в диагностике и классификации рака молочной железы чаще они являются как прогностическими, так и предиктивными.

Например, наличие высокой экспрессии HER2. Если рак молочной железы her2 положительный (большое количество в опухоли белка HER2), то он протекает агрессивно, с ранним метастазированием в отдаленные органы. А если опухоль содержит малое количество этого белка (рак молочной железы her2 негативный), она не будет реагировать на применение таргетного препарата герцептина.

Рекомендуем прочесть статью о том, что такое люминальный рак молочной железы. Из нее вы можете узнать, как современные методы исследования помогают определить подтипы рака, как выбирают оптимальный метод лечения рака молочной железы в зависимости от результатов исследования.

“Базальные” ИГХ маркеры

Существует подразделение рака молочной железы в зависимости то того, какие гены экспрессируют его клетки (профиль экспрессии генов).

Опухоли, профиль которых характерен для базальных или миоэпителиальных клеток нормальной молочной железы, будут показывать наличие «базальных» маркеров. Такие опухоли имеют неблагоприятный прогноз.

В большинстве из этих «базальных» опухолей полностью отсутствуют ER, PR (рецепторы к эстрогену и прогестерону) и белок HER2. Они часто метастазируют в головной мозг, в легкие.

На сегодня нет консенсуса по иммуногистохимическому профилю (какие ИГХ маркеры должны применяться), который бы четко определял эти «базальные» раки.

К этим опухолям с плохим прогнозом относится и так называемый «трижды негативный рак молочной железы», в котором отсутствуют ER, PR и HER2, но экспрессируются базальные цитокератины 5/6 и 14, рецептор эпидермального фактора роста (EGFR) и C-KIT. Они могут также экспрессировать P-кадгерин и часто p63.

Есть сходство между «базальным» раком молочной железы и раками, которые выявляются у женщин с BRCA1 мутацией.

EGFR экспрессируется часто в «базальных» раках, поэтому пациентки с такими опухолями могут извлечь пользу при лечении ингибиторами EGFR.

ИГХ маркеры пролиферации (скорости роста опухоли)

Количество митозов или процент клеток, находящихся в митозе, давно считается морфологическим «биомаркером» прогноза рака. Существует ряд ИГХ маркеров, которые демонстрируют пролиферативную активность клеток (количество митозов):

  • Ki67 — антиген, который экспрессируется в ядрах клеток на всех этапах клеточного цикла и является полезным маркером клеточной пролиферации;
  • MIB1 — антитело, которое реагирует с Ki-67 в ткани, зафиксированной формалином или парафином;
  • PPh3.

ИГХ маркеры апоптоза

Апоптоз или «запрограммированный суицид клетки» является биомаркером агрессивных опухолей. Белки апоптоза можно идентифицировать с помощью ИГХ:

Другие “прогностические” маркеры

  • р53. Мутации в гене р53 супрессора опухолей (TP53) выявляются в 20-30% случаях рака молочной железы. Эти генные мутации наблюдаются чаще у женщин с наследственными синдромами рака молочной железы, чем у женщин с спорадическим раком. Для пациентки с генетической предрасположенностью к раку молочной железы может быть рекомендовано р53-тестирование. Обнаружение мутаций в р53 также рассматривается в качестве возможного предсказателя ответа рака молочной железы на химиотерапию, но обнаружение белка р53 иммуногистохимически в опухоли не отражает статус мутации р53.
  • Топоизомераза II альфа. Это мишень, на которую направлено действие антрациклина — химиотерапевтического препарата, который часто используется в лечение рака молочной железы.

Источник: http://GrudInfo.ru/igh-molochnoi-zhelezy/

Что такое иммуногистохимия

Сегодня качественная диагностика раковых заболеваний немыслима без проведения иммуногистохимии. Это современный высокоинформативный метод, который позволяет не только установить наличие раковой опухоли, но и определиться с тактикой лечения рака.

Иммуногистохимия – это высокоточный метод диагностики, который позволяет выявить и идентифицировать антигены опухолей – специфические вещества, которые присущи раковым клеткам.

В настоящее время иммуногистохимический анализ используется для диагностики злокачественных опухолей, и позволяет установить точный диагноз.

Кроме того, с помощью иммуногистохимии врач может оценить, какой будет ответная реакция на лечение.

Иммуногистохимическое исследование позволяет верифицировать результаты ранее проведенных исследований, а также исключить другие возможные раковые заболевания. Примечательно, что назначение тех или иных препаратов для лечения рака также должно быть подтверждено иммуногистохимическим исследованием.

Суть исследования

Иммуногистохимический тест заключается в исследовании клеток ткани опухоли, которое проводится с помощью специальных реактивов. Эти реактивы содержат антитела – специфические белки, меченые определенными веществами, которых можно детектировать (например, флуоресцентные красители, ферменты, коллоидное золото и другие).

Антитела имеют специфическую пространственную структуру, которая позволяет им связываться с антигеном – искомым веществом в опухолевых клетках. Такая химическая реакция называется «антиген-антитело», и указывает на наличие специфических для опухоли веществ во взятом образце.

В частности, в ходе иммуногистохимического исследования могут искать некоторые рецепторы к гормонам (например, эстрогену, прогестерону и другим), онкологические маркеры, маркеры усиленного роста раковых клеток и другие антигены.

В клинической практике чаще всего применяется метод непрямой иммуногистохимии, когда антигены, полученные из ткани пациента, связывают с первичными антителами. Так получается комплекс «антиген-антитело», к которым прикрепляют вторичные антитела. Такой комплекс можно окрасить специальными красителями, и по выраженности окраски специалисты оценивают статус опухоли.

В каких целях проводится иммуногистохимия

Если пациенту назначается иммуногистохимия, то этим врач преследует несколько целей:

  • Иммуногистохимия позволяет выявить гистологическую и нозологическую принадлежность опухоли. С помощью этого исследования определяется класс новообразования.
  • С помощью иммуногистохимии определяется локализация первичного очага новообразования. В частности, если месторасположение не установлено, то выявить его можно и по отдельному метастазу.
  • Иммуногистохимия позволяет определиться с тактикой лечения. В частности, этот метод исследования позволяет выявить чувствительность опухолевых клеток к воздействию препаратов таргетной терапии или химиотерапии. С помощью иммуногистохимии врачи определяют резистентность опухоли к некоторым группам химиотерапевтических препаратов. Например, опухоли молочной железы, которые имеют рецепторы к эстрогену лечат немного иначе (в протокол лечения добавляется гормональная терапия). Исследования на протоонкоген her-2-neu позволяют выяснить чувствительность раковой опухоли молочной железы на некоторые противоопухолевые препараты. Если говорить о тесте на маркер пролиферации, то с его помощью определяется степень агрессивности опухоли.

Для проведения иммуногистохимии изначально пациенту назначается биопсия – взятие образца опухолевой ткани. В настоящее время существует несколько методик проведения биопсии.

Как правило, эта процедура выполняется с помощью тонкой иглы, которой можно извлечь образец ткани. Опухоли, которые располагаются в сложных участках (например, головном мозгу), проверяются уже после оперативного удаления.

Полученную в ходе операции опухоль отправляют в лабораторию на гистологическое исследование.

Полученный в ходе биопсии материал фиксируют и подготавливают к работе. Образец заливают парафином (что позволяет его хранить долгое время), после чего делают срезы и помещают на стекла для проведения иммуногистохимических исследований (обработка антителами и окрашивание).

Каковы преимущества иммуногистохимии

У иммуногистохимического исследования есть немало преимуществ, среди которых:

  • Минимальное количество материала и реагентов, которые требуются для проведения исследования.
  • Быстрое получение результатов исследования. Так, результаты реакции иммуногистохимии появляются спустя 3 часа.
  • Возможность использования материала через длительное время после его забора (материал хранится в парафине).
  • Возможность установления стадии заболевания и типа клеток.
  • Возможность установления первичного очага опухоли.
  • Высокая точность и достоверность полученных результатов.

Иммуногистохимия – метод диагностики, который проводится в специально оборудованных лабораториях. Прежде, чем выполнять данное обследование, поинтересуйтесь классом лаборатории.

В частности, в некоторых лабораториях, например, окрашивание полученных материалов выполняют вручную, а в некоторых – автоматическим способом. Ручной метод окраски повышает вероятность получения ошибок.

Поэтому для начала пациенту следует проконсультироваться со своим врачом, а также поинтересоваться, каким образом в той или иной лаборатории будут проводиться исследования.

Источник: http://www.likar.info/metodyi-diagnostiki/article-79582-immunogistohimiya-dlya-chego-ona-provoditsya/

Ссылка на основную публикацию